人骨髓间充质干细胞外泌体通过miR-93-5P介导改善肾纤维化

目的:探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)外泌体(exosomes,BM-exo)中微小RNA-93-5P(microRNA-93-5P,miR-93-5P)对小鼠肾脏单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型的肾脏保护作用及其机制.方法:16只6周龄雄性Balb/c小鼠被分为假手术(Sham)组、UUO+磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)(UUO模型)组、UUO+BM-exo治疗(BM-exo)组、UUO+BM-exo/miR-93-5P抑制剂(BM-exo/miR-93-5P抑制剂)组,每组4只.在UUO术后的第1、3、5天分别对UUO模型组、BM-exo组和BM-exo/miR-93-5P抑制剂组小鼠尾静脉注射0.1 mL PBS、200μg外泌体和200μg加入miR-93-5P抑制剂的外泌体,UUO术后7 d统一处死小鼠,收集各组小鼠的血清,检测血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)的表达;留取各组小鼠肾脏组织,采用免疫荧光法验证外泌体在小鼠肾脏内的吞噬情况;HE、过碘酸雪夫(periodic acid-schiff,PAS)和Masson染色法评估肾组织病理学改变;Western Blot法和免疫组化方法检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白(αsmooth mus-cle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin,FN)和上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达及组织分布情况.结果:与UUO模型组比较,BM-exo组小鼠肾组织病理学改变明显改善;α-SMA、FN、E-cadherin的蛋白表达和组织分布均明显降低,BM-exo/miR-93-5P抑制剂组的变化趋势则与BM-exo组相反.结论:BM-exo通过miR-93-5P介导可显著改善UUO小鼠肾脏的纤维化.