miR-501通过下调eIF4E3促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨miR-501对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制.方法 采用qRT-PCR检测miR-501和eIF4E3 mRNA表达,应用Western blot法检测eIF4E3蛋白水平,CCK-8和细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力,运用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验检测miR-501与eIF4E3的靶向关系.结果 miR-501在胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823和MGC-803中表达水平分别是正常胃黏膜上皮细胞GES-1的2.78±0.28、2.51±0.30和1.62±0.14倍(P均<0.05).TCGA数据库分析显示miR-501在胃癌组织中表达显著高于正常胃组织(P<0.001).miR-501 mimic转染BGC-823细胞(miR-501组)增殖活性明显高于miRNA无关序列对照(NC组)(P均<0.05);Transwell小室迁移实验miR-501组穿膜细胞数(587±16)个,高于阴性NC组的(396±34)个(P<0.05);Transwell小室侵袭实验miR-501组穿膜细胞数(553±43)个,高于NC组的(398±21)个(P<0.05).miR-501和野生型eIF4E3载体共转染细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.01).转染miR-501可使eIF4E3 mRNA和蛋白水平显著降低.与siRNA无关序列(NCi组)相比,eIF4E3敲低(eIF4E3-si组)可显著增强BGC-823细胞增殖活性(P<0.05);Transwell小室迁移实验eIF4E3-si组穿膜细胞数(299±32)个,多于阴性NCi组的(182±13)个(P<0.01),Transwell小室侵袭实验也呈相同趋势(P<0.01).TCGA数据库分析显示eIF4E3 mRNA在正常胃组织中表达显著高于胃癌组织(P<0.001).结论 miR-501可通过靶向下调抑癌基因eIF4E3表达,促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力;miR-501有望成为胃癌治疗的潜在靶点.