半夏泻心汤加减治疗多囊卵巢综合征及胰岛素抵抗"异病同治"的网络药理学分析及实验验证

目的 构建半夏泻心汤加减的单味药—成分—共有靶点网络、蛋白相互作用(Protein-Protein Interaction,PPI)网络,探究半夏泻心汤加减治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)及胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)"异病同治"的作用机制.方法 在TCMSP、GeneCards、Disgenet、Drugbank等数据库平台对半夏泻心汤加减组成药物的活性成分、作用靶点及PCOS、IR的疾病靶标进行检索筛选,将药物成分靶点与疾病靶标取交集,采用STRING数据库、Cytoscape 3.7.2软件及相关插件构建PPI网络图,筛选关键成分,利用生物学信息注释(database for annotation visualization and integrated discovery,DAVID)数据库对核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析、京都基因和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析.使用来曲唑联合高脂饮食构建PCOS IR模型,以半夏泻心汤加减进行干预,运用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及蛋白质印迹法(western blot,WB)法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白表达进行初步验证.结果 以口服生物利用度(oral bioavailability,OB)和类药性(drug likeness,DL)数值作为筛选标准,从半夏泻心汤加减中共获得82个活性成分,涉及191个半夏泻心汤加减治疗PCOS及IR的可能的共同靶点,这些靶点主要富集在癌症、乙型肝炎、PI3K-Akt、MAPK、TNF等信号通路上.实验验证结果证实,本实验造模后,与空白组相比,模型组大鼠血清IL-6水平、卵巢组织IL-6蛋白的表达水平明显上升(P<0.05);使用半夏泻心汤加减干预后,中药组大鼠血清IL-6水平、卵巢组织IL-6蛋白的表达水平明显下降(P<0.05).结论 PCOS及IR是受多基因调控的复杂疾病,半夏泻心汤加减治疗上述疾病的作用机制与调控炎症通路、胰岛素信号通路等途径有关.