芹菜素对人肺鳞癌细胞NCI-H520增殖、转移、凋亡及自噬的影响

目的 研究芹菜素对人肺鳞癌细胞NCI-H520增殖、转移、凋亡及自噬的影响.方法 体外培养人肺鳞癌细胞NCI-H520,采用CCK-8法检测不同浓度芹菜素(2.5、5、10、20μmol/L)或顺铂(2.5、5、10、20μmol/L)对细胞活力的影响;采用细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)检测芹菜素或顺铂对细胞分裂能力的影响;采用划痕实验和Transwell实验检测芹菜素对细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Annexin V/PI双染法、Hoechst 33258核染色法检测芹菜素对细胞凋亡的影响;透射电镜观察细胞内自噬嚢泡的产生情况;吖啶橙(AO)染色观察细胞内酸性细胞器的变化;Western blot检测微管相关蛋白1轻链3 B-Ⅱ(LC3 B-Ⅱ)和p62蛋白表达情况.结果 与对照组相比,CCK-8法和CFDA SE结果显示芹菜素或顺铂使NCI-H520细胞的增殖水平下降(P<0.05);划痕实验和Transwell实验表明芹菜素使细胞的迁移和侵袭水平下降(P<0.01);Annexin V/PI双染结果显示芹菜素可使细胞凋亡率增加(P<0.05);Hoechst 33258核染色显示芹菜素可促进细胞出现细胞核聚缩和浓染;AO染色荧光值增大、电镜下细胞出现自噬双分子结构、Western blot中LC3 B-Ⅱ和p62蛋白表达水平上升的结果表明芹菜素增加了细胞NCI-H520的自噬水平(P<0.05);加入氯喹(CQ)后,未能增加芹菜素作用细胞中LC3 B-Ⅱ和p62的蛋白水平.结论 不同浓度芹菜素能抑制人肺鳞癌细胞NCI-H520增殖、迁移、侵袭,其抑制细胞的生长转移可能与诱导细胞凋亡和自噬有关,且自噬水平的升高可能是阻断自噬体的降解所致.