正相高效液相色谱法测定IMH中氯代烷烃类遗传毒性杂质氯代物

目的:建立抗脂肪肝治疗药4,4'-二甲氧基-5,6,5',6'-双(亚甲二氧基)-2'-吗啉亚甲基联苯-2-甲酸甲酯甲磺酸盐(简称IMH)中氯代烷烃类遗传毒性杂质4,4'-二甲氧基-5,6,5',6'-双(亚甲二氧基)-2'-氯甲基-2-甲酸甲酯(简称氯代物)的分析方法.方法:采用正相高效液相色谱(NP-HPLC)法,选用 Phenomenex Luna ? Silica 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以正己烷-异丙醇(95∶5)为流动相,流速0.8 mL·min-1,检测波长226 nm,柱温35℃,进样量50 μL;采用外标法对氯代物进行定量.结果:在水相中易分解的氯代物在该正相色谱方法条件下能够达到有效分离,专属性良好;氯代物质量浓度在0.03～3.0 μg·mL-1的范围内呈现良好的线性关系,检测限和定量限分别为0.15 ng和0.31 ng;平均回收率处于99％～103％,精密度及溶液稳定性良好.3批实测样品中均未检出氯代物,表明后续工艺能有效清除本品中的氯代物.结论:该色谱方法快速、准确、灵敏,能够对IMH中的氯代物进行准确的定性定量分析,有效控制药物安全.同时,可为含有卤代烷烃类遗传毒性杂质的其他药物的质量控制提供参考方法.