LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中13个成分的含量

目的:建立LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中栀子苷、芍药内酯苷、芍药苷、连翘酯苷A、甘草苷、黄芩苷、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄酸、甘草酸共13个成分的含量.方法:采用Poroshell 120 SB-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7 μm),以0.1％甲酸水与甲醇-乙腈(1∶1)为流动相,梯度洗脱,流速0.45 mL·min-1,柱温40℃;采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测模式(MRM)进行负离子扫描.结果:栀子苷质量浓度在9～900 ng·mL-1,芍药内酯苷在 1～100 ng·mL-1,芍药苷在 12～1 200 ng·mL-1,连翘酯苷 A 在 12～1 800 ng·mL-1,甘草苷在 1～100 ng·mL-1,黄芩苷在8～800 ng·mL-1,连翘苷在5～500 ng·mL-1,千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在5～500 ng·mL-1,汉黄芩苷在5～500 ng·mL-1,黄芩素在2～200 ng·mL-1,汉黄芩素在0.4～40 ng·mL-1,大黄酸在0.4～40 ng·mL-1,甘草酸在5～500 ng·mL-1范围内线性关系良好(r＞0.998 5);平均加样回收率(n=6)范围均为97.0％～110.5％,RSD为3.2％～9.6％;5个批次样品中,13个成分的含量分别为栀子苷4.933～5.800 mg·g-1,芍药内酯苷0.104～0.123 mg·g-1,芍药苷 3.140～4.159 mg·g-1,连翘酯苷A 17.40～21.05 mg·g-g,甘草苷0.354～0.425 mg·g-1,黄芩苷4.991～6.422 mg·g-1,连翘苷 1.446～1.906 mg·g-1,千层纸素 A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 0.441～0.534 mg·g-1,汉黄芩苷 0.925～1.138 mg·g-1,黄芩素0.129～0.151 mg·g-1,汉黄芩素0.084～0.106 mg·g-1,大黄酸0.051～0.063 mg·g-1,甘草酸0.964～1.242 mg·g-1.结论:该方法特异、灵敏、高效、可靠,可用于小儿豉翘清热颗粒的质量控制.