嗜水气单胞菌刺激下鲤血清质子转运载体15a2(Slc15a2)的表达分析

为解析鲤质子转运载体15a2(Slc15a2)在嗜水气单胞菌侵染过程中对机体免疫应答机制的影响,实验通过制备鼠源Slc15a2-1和Slc15a2-2多克隆抗体,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测嗜水气单胞菌感染后鲤血清中Slc15a2-1和Slc15a2-2蛋白表达变化.结果显示,①感染后2个拷贝的最高蛋白表达水平与空白对照组相比,分别增加了4.81和2.48倍;与Slc15a2-1相比Slc15a2-2的表达量从0～48 h一直处于较高表达水平.②从整体来看,Slc15a2的2个拷贝具有相似的表达趋势,均为先升高后降低、再升高再降低;但Slc15a2-1在3 h达到第1个表达高峰,而Slc15a2-2则在6 h达到第1个表达高峰.③6～24 h的4个时期中,Slc15a2-1和Slc15a2-2蛋白表达呈现互补的表达趋势,即在同一时期一个拷贝的表达量显著下降,另一个拷贝的表达量显著升高,但总体维持较高表达水平.结果表明,本实验制备的鼠源Slc15a2-1和Slc15a2-2多克隆抗体具有较高的亲和力和特异性,当鲤受到嗜水气单胞菌侵染后,2个拷贝整体具有相似的表达趋势,说明可能具有相似的基因功能;与Slc15a2-1相比,Slc15a2-2在0～48 h之间具有显著的高表达量,推测该基因为2个拷贝中的主效基因,并且6～24 h时,2个拷贝一直呈现互补的表达方式,导致Slc15a2表达量维持在高水平,面对病原侵害时能做有效响应.本研究为深入了解鲤Slc15a2的免疫防御机制提供一定的研究基础.