转化体qXY中外源基因表达重组蛋白PA的食用安全性评价

目的 从毒性和过敏性2个方面对转化体qXY中外源基因表达重组蛋白PA进行食用安全性评价.方法 对大肠杆菌表达重组蛋白PA和转化体qXY中植物提取蛋白PA进行等同性分析后,分别采用毒性蛋白数据库和过敏原数据库对PA蛋白氨基酸序列进行毒性和过敏性生物信息学分析,对重组PA蛋白进行模拟胃/肠液消化稳定性试验,并且采用限量法对重组蛋白PA进行小鼠急性经口毒性试验.结果 大肠杆菌表达重组蛋白PA和转化体qXY中植物表达蛋白PA的表观分子量均为55 kD,且二者均可与PA蛋白特异性抗体结合,二者均无翻译后糖基化修饰,飞行质谱分析重组PA蛋白N端1-10氨基酸残基与理论序列一致,因此认为二者具有等同性.毒性生物信息学分析未发现PA蛋白与毒性蛋白数据库中已知毒蛋白具有序列相似性,CD-1小鼠急性经口毒性试验结果显示,5 000 mg/kg·BW剂量下未产生毒性效应.过敏性生物信息学发现,PA蛋白与已知过敏原高峰淀粉酶A(Asp o 21)存在较高的序列同源性,但模拟胃/肠液消化稳定性试验结果显示,重组蛋白PA在模拟胃液和肠液中0～15 s内均迅速消化,属于极易消化,不具有潜在过敏性.结论 未发现转化体qXY中外源基因表达重组蛋白PA具有潜在毒性和过敏性,验证了该蛋白的食用安全性.