石胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响

目的 观察石胆酸(lithocholic acid,LCA)对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的影响.方法 分离原代小鼠腹腔巨噬细胞并培养,待细胞生长至70％融合时,饥饿处理细胞16～18 h,实验组给予不同浓度LCA(10,20,30 μmol//L)或给予LCA 30 μmol/L干预不同时间(1,2,3,4 h),对照组用LCA的溶剂二甲基亚砜(DMSO)干预.提取上述干预后细胞的蛋白,用Western blot 检测内质网应激相关分子 Chop、p-p38MAPK 和凋亡关键分子 Caspase-3、cleaved-Caspase-3、PARP、cleaved-PARP.另外,LCA(30 μmol/L)干预巨噬细胞1 h,TUNEL检测细胞凋亡情况.结果 与对照相比,LCA可显著升高内质网应激相关蛋白Chop和p-p38MAPK的表达,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);与对照相比,LCA可显著升高凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP的表达并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05),并可诱导巨噬细胞凋亡.结论 LCA能够诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生内质网应激和凋亡.