环介导等温扩增技术检测柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶N377D突变
Chinese Journal of Veterinary Science（2022）
摘要
面对日益严重的磺胺类药物的耐药性,传统的耐药性检测方法已不能满足临床需求,因此开发一种磺胺耐药柔嫩艾美耳球虫检测方 法十分 必要.本试验建立一种使用环介导等 温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)来准确区分柔嫩艾美耳球虫二氢蝶酸合酶(dihydropteroate synthase,DHPS)基因中的点突变(A1129G)的方法.对LAMP反应进行优化,发现在68℃,60 min时,反应的灵敏度和特异性均达到最佳.此时,该方法的最低检测限40 fg,并对5种病原体显示出特异性.在检测的所有46个现场样品中,有43个为阳性结果.
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