人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型的建立及其蛋白质和脂质含量检测

目的:旨在体外建立一种具有自发成球和多向分化潜能的人脑胶质瘤干细胞三维球体扩增模型，并了解其蛋白质和脂质及其次级成分含量，为进一步研究球体的代谢奠定基础。方法:分别将人脑胶质瘤干细胞GSC23和SU3在无血清干细胞培养液中培养，培养约2~3周收集细胞球。在多聚甲醛溶液中固定，脱水，石蜡包埋，切片，免疫组织化学染色检测胶质瘤相关标志蛋白，拉曼成像分析球体组织中的蛋白质和脂质及其次级成分含量。采用单因素方差分析比较大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量。结果:两种干细胞均能在培养皿内形成类似实体瘤的干细胞扩增球体。免疫组织化学染色显示，多形性胶质母细胞瘤常见标志蛋白CD133、Nestin、表皮生长因子受体、S100、Olig2、p53、Ki－67、胶质纤维酸性蛋白、vimentin、CXC趋化因子受体4和CD34全部表达。拉曼成像显示，所构建的人脑胶质瘤干细胞扩增球体中含有蛋白质(2 930、1 685和1 586 cm －1)、脂质(2 845和1 444 cm －1)、苯丙氨酸(1 003 cm －1)和酰胺Ⅲ(1 250 cm －1)，大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量差异无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:体外成功构建了人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型，其不仅具有三维实体瘤的外形特征和无限扩增能力，还有稳定储存蛋白质和脂质等肿瘤细胞代谢必备能源的能力，有望作为体外人脑胶质瘤研究的工具。