骨髓间充质干细胞对大鼠缺血性脑卒中炎症反应中小胶质细胞的分子调控机制

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞对缺血性脑卒中炎症反应中小胶质细胞的逆转作用是否由CX3C配体1(CX3CL1)来介导.方法 选择大鼠30只,随机选择1只做2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色.参照改良的Zea Longa线栓法构建大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,最终纳入大鼠20只,随机选取2只模型大鼠做TTC染色检测脑梗死灶.将构建好的MCAO模型随机分为2组,每组9只.TTC染色验证模型的成功率.对照组采用侧脑室定位注射移植骨髓间充质干细胞(BMSC),实验组采用侧脑室定位注射CX3CL1干扰慢病毒感染的BMSC.2组分别于1、3、7 d将大鼠断头取材.将脑组织切片均进行抗Iba和抗CD206/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)双重免疫荧光染色,然后在光扫描共聚焦显微镜下计数双染重合阳性的细胞数并进行比较.采用SPSS 18.0统计软件进行数据分析.组间比较采用单因素方差分析.结果 成功构建大鼠MCAO模型,TTC染色结果可见MCAO模型组存在大脑中动脉供血区的梗死病灶.免疫荧光染色统计结果提示,与实验组比较,对照组在1、3、7d缺血区抗炎型小胶质细胞(Iba+CD206+)的数量明显增加[(8.644±1.131)和(3.000±1.206)个/每400×高倍视野,(7.866±1.254)和(3.155±1.205)个/每400×高倍视野,(7.111±1.555)和(2.866±1.272)个/每400×高倍视野,均P<0.001];在3和7 d促炎型小胶质细胞(Iba+TNF-α+)的数量明显减少[(4.222±0.974)和(8.355±1.264)个/每400×高倍视野,(4.267±1.321)和(7.822±1.556)个/每400×高倍视野,均P<0.001].结论 MCAO模型在移植BMSC后对脑卒中缺血区小胶质细胞的逆转作用可能是由CX3CL1来介导的.