槲皮素对人牙龈间充质干细胞功能的影响

目的:研究槲皮素对人牙龈间充质干细胞（GMSCs）的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、表面标志物表达和成骨分化能力的影响。方法:以不使用槲皮素处理GMSCs为对照组，CCK-8法检测2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素对GMSCs细胞增殖的影响。10 μmol/L、20 μmol/L槲皮素处理GMSCs细胞96 h后，流式细胞术检测细胞凋亡及表面标志物的表达，免疫印迹法检测GMSCs细胞Cleaved PARP、p-BCL-2、Bax和Cleaved Caspase 3蛋白表达。10 μmol/L槲皮素处理4周后，茜素红染色检测槲皮素对GMSCs成骨分化能力的影响。结果:与对照组相比，不同浓度的槲皮素干预GMSCs后细胞存活率明显下降；2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素处理96 h后GMSCs的存活率分别为78.93%、66.81%、56.35%、39.22%（ P<0.05）。不同浓度槲皮素处理96 h后流式细胞术检测显示GMSCs的早期凋亡和晚期凋亡细胞数量均明显增加，对照组、10 μmol/L槲皮素组、20 μmol/L槲皮素组的细胞凋亡率分别为8.30%、17.88%、20.77%（ P<0.05）；免疫印迹法检测显示，与对照组比较，10 μmol/L槲皮素组和20 μmol/L槲皮素组GMSCs的促凋亡蛋白Cleaved PARP、Bax和Cleaved Caspase 3表达增加，抑制凋亡蛋白p-BCL-2表达减少（均 P<0.05）；流式细胞术检测显示，与对照组相比，10 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD90阳性率从88.4%降低至15.3%；20 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD45阳性率从3.18%上升至9.77%，CD34阳性率从1.08%上升至5.70%（均 P<0.05）。茜素红染色显示，10 μmol/L槲皮素组处理4周后GMSCs未见矿化结节形成。 结论:槲皮素能显著抑制GMSCs细胞功能，提示在进行GMSCs培养或者治疗时应避免槲皮素等黄酮类物质的干扰作用。