原儿茶酸抑制结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡的机制研究

目的 探讨原儿茶酸对结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡影响和机制.方法 肺泡巨噬细胞NR8383分成对照组、模型组(结核分枝杆菌Rv1654诱导)、实验低剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,20μmol·L-1原儿茶酸处理)、实验中剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,40μmol·L-1原儿茶酸处理)、实验高剂量组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,80μmol·L-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+Vector组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染阴性对照载体,80μmol·L-1原儿茶酸处理)、实验高剂量+TLR2组(结核分枝杆菌Rv1654诱导,转染TLR2过表达载体,80μmol·L-1原儿茶酸处理).用蛋白质印迹(Western blot)法检测Toll样受体2(TLR2)蛋白的表达水平,用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用JC-1法检测线粒体膜电位.结果 对照组、模型组、实验低剂量组、实验中剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+Vector组、实验高剂量+TLR2组肺泡巨噬细胞中TLR2蛋白相对表达量分别为0.23±0.04,0.66±0.09,0.53±0.02,0.41±0.03,0.29±0.02,0.31±0.04和0.48±0.05,细胞凋亡率分别为(4.17±0.29)％,(14.41±0.37)％,(10.51±1.02)％,(8.40±0.59)％,(6.77±0.58)％,(6.46±0.32)％和(9.78±0.96)％,线粒体膜电位分别为(17.30±1.63)％,(6.47±0.49)％,(8.30±0.85)％,(10.31±1.37)％,(14.27±1.68)％,(14.00±1.06)％和(8.66±0.60)％,模型组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验低、中、高剂量组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验低、中剂量组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验中剂量组与实验高剂量组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验高剂量+Vector组的上述指标与实验高剂量+TLR2组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 原儿茶酸通过下调TLR2抑制线粒体途径减少结核分枝杆菌Rv1654诱导肺泡巨噬细胞凋亡.