电针"足三里""关元"穴对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达的影响

目的:观察电针"足三里""关元"对佐剂性关节炎(AIA)大鼠滑膜组织细胞凋亡率及其他凋亡蛋白含量的影响,探讨电针通过死亡受体(Fas)凋亡途径调节滑膜细胞凋亡和抗炎治疗类风湿关节炎(RA)的机制.方法:SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组、电针组,每组6只.选用弗氏完全佐剂注射法制备AIA大鼠模型.造模后第3天开始干预,甲氨蝶呤组按照0.35 mg/kg的剂量进行灌胃,每周2次;电针组予以电针"足三里""关元",每次20 min,每周6次;两组均干预4周.用足趾容积测量仪测量各组大鼠左后肢足趾容积,HE染色观察踝关节滑膜组织形态变化,ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)含量,TUNEL染色观察踝关节滑膜细胞凋亡率,Western blot法检测踝关节滑膜组织中凋亡相关基因Fas、死亡受体配体(FasL)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠同时点左足趾容积增加(P<0.01),血清IL-1、TNF-α含量升高(P<0.01),滑膜细胞凋亡率及滑膜组织Fas、FasL、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.01).与模型组比较,甲氨蝶呤组、电针组大鼠第17、24天足趾容积减小(P<0.01),血清IL-1、TNF-α含量降低(P<0.01),滑膜细胞凋亡率增加(P<0.01),甲氨蝶呤组滑膜组织Fas、FasL蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),电针组滑膜组织Fas、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).与甲氨蝶呤组比较,电针组滑膜组织FasL蛋白表达降低(P<0.05).HE染色显示模型组大鼠滑膜组织滑膜衬里层增生明显,滑膜细胞排列紊乱,部分细胞出现水肿,有纤维组织增生,炎性细胞浸润;甲氨蝶呤组大鼠滑膜部分增厚,炎性细胞浸润较模型组减少;电针组大鼠滑膜形态较模型组显著改善,滑膜增生情况较模型组减轻,炎性细胞浸润减少.结论:电针"足三里""关元"能增加AIA大鼠滑膜细胞凋亡率,上调滑膜组织Fas、Caspase-3蛋白表达,表明电针治疗RA可能通过Fas凋亡途径促进滑膜细胞凋亡,发挥缓解滑膜炎性反应的作用.