乌骨鸡胚胎期脂肪组织可视化标本的制作方法

目的 为研究乌骨鸡胚胎期脂肪组织的沉积特征,建立乌骨鸡胚胎期脂肪组织可视化标本的制作和保存方法.方法 以无量山乌骨鸡胚胎期第11日胚龄(E11)到出壳当日(D0)的E11、E12、E14、E16、E18、E20和D0共7个阶段胚胎为对象,对甲醛和多聚甲醛作为固定剂的效果进行比较,确定标本制作选择使用的固定剂;在保证脂肪组织可被完整辨析前提下,确定1％KOH溶液对不同胚龄标本的处理时间;将剥制好的标本浸于甘油中进行拍照确定脂肪组织的沉积部位特点;以环氧树胶-水晶滴胶为材料,通过打底—固定—封样—封顶—打磨抛光等,对剥制好的标本制为滴胶标本的制作条件进行探索.结果 多聚甲醛可替代甲醛作为固定剂,多聚甲醛处理24 h可实现胚胎期标本的良好固定;1％KOH溶液浸泡去除皮肤的处理时间随着胚龄增加也相应延长,E11至E14需要处理24 h,E16需要处理36 h,而E18至D0则需要48 h;采用环氧树胶—水晶滴胶材料制备的滴胶标本可实现对鸡胚胎期脂肪组织可视化标本的长期保存.结论 研究建立了乌骨鸡胚胎期脂肪组织可视化标本制作方法,使乌骨鸡胚胎期脂肪组织形成的时间和分布部位等特征观察简便快捷,且滴胶标本安全环保可长久保存.