木犀草素对癫痫持续状态幼鼠海马组织神经细胞保护作用的机制研究

Zhejiang Medical Journal(2022)

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摘要
目的 探讨木犀草素对癫痫持续状态(SE)幼年大鼠(下称幼鼠)海马组织神经细胞保护作用的机制.方法 将156只21日龄雄性SD幼鼠按随机数字表法分为对照组12只、模型组48只、木犀草素1组(低剂量20 mg/kg)48只和木犀草素2组(高剂量50 mg/kg)48只,其中模型组、木犀草素1组和木犀草素2组在癫痫发作后的1、2、3和7 d分别处死12只幼鼠.采用氯化锂-匹罗卡品法制作幼鼠SE模型,木犀草素1组和木犀草素2组在造模成功后,腹腔注射相应剂量的木犀草素,此后每天重复注射1次,直至处死.采用qRT-PCR法检测幼鼠海马组织中NF-κB、Toll样受体4(TLR4)、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)、TNF-αmRNA表达水平,Western blot法检测幼鼠海马组织中TLR4蛋白表达水平,TUNEL法观察幼鼠海马CA1区神经细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,癫痫发作后1、2、3和7 d模型组幼鼠海马组织中TLR4、NF-κB、Caspase-3、TNF-αmRNA及TLR4蛋白表达水平均升高(均P<0.01);与模型组比较,癫痫发作后1、2、3和7 d木犀草素2组幼鼠海马组织中TLR4、NF-κB、Caspase-3、TNF-αmRNA及TLR4蛋白表达水平均降低(均P<0.05),癫痫发作后3和7 d木犀草素1组幼鼠海马组织中TLR4 mRNA表达水平均降低(均P<0.05),癫痫发作后1和3 d木犀草素1组幼鼠海马组织中Caspase-3 mRNA表达水平均降低(均P<0.05),癫痫发作后3 d木犀草素1组幼鼠海马组织中TNF-αmRNA表达水平降低(P<0.01),癫痫发作后7 d木犀草素1组幼鼠海马组织中TLR4蛋白表达水平降低(P<0.05).与对照组比较,癫痫发作后1、2、3和7 d模型组大鼠海马组织中神经细胞凋亡率均升高(均P<0.01);与模型组比较,癫痫发作后1、2、3和7 d木犀草素2组幼鼠海马组织神经细胞凋亡率均降低(均P<0.01),癫痫发作后2、3和7 d木犀草素1组幼鼠海马组织神经细胞凋亡率均降低(均P<0.05).结论 木犀草素可减轻SE幼鼠海马组织的炎症反应和细胞凋亡,其机制可能是通过调控TLR4/NF-κB通路来达到神经保护作用.
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