CHS启动子差异片段在不同观赏海棠品种(系)中的功能验证

[目的]为探明查尔酮合酶基因的启动子序列差异在不同苹果属观赏海棠品种(系)中的功能.[方法]以'王族'(Malus cv.'Royalty')和 M10-5(Malus M10-5)及'火焰'(Malus cv.'Flame')叶片为试材,克隆得到McCHS基因的启动子,并进行序列比对.检测McCHS基因在3个品种(系)中的表达水平,进一步通过酵母单杂交和凝胶阻滞迁移分析确定McCHS基因的启动子序列差异和调控花色素苷生物合成关键MYB转录因子McMYB10的结合关系.[结果]'火焰'McCHS基因启动子与'王族'McCHS基因启动子序列比对发现,'火焰'McCHS基因启动子中有743 bp的缺失,而M10-5的McCHS基因启动子同时拥有缺失和完整的两种启动子序列;酵母单杂交和凝胶阻滞迁移结果表明,743 bp缺失序列能够和McMYB10结合,而且McCHS基因的表达量和花色素苷含量呈相同趋势.[结论]McCHS基因的启动子序列差异可能影响观赏海棠叶片着色.