人胎盘间充质干细胞外泌体促进人肺血管内皮细胞血管形成和迁移

目的 探讨人胎盘间充质干细胞外泌体(HPMSCs-EX)对脂多糖(LPS)诱导损伤的人肺血管内皮细胞(HPVECs)血管形成和迁移能力的影响.方法 采用酶消化法提取人胎盘间充质干细胞(HPMSCs),显微镜下观察细胞形态及诱导分化能力;从培养上清中分离纯化HPMSCs-EX,对其生物学特征进行鉴定,并利用荧光显微镜观察HPVECs对HPMSCs-EX摄取情况.将HPVECs分为对照组(NC组)、外泌体组(NC+HPMSCs-EX组)、损伤组(LPS组)及外泌体治疗组(LPS+HPMSCs-EX组),通过血管形成实验、迁移实验、划痕实验、免疫荧光实验及Western blot实验检测HPMSCs-EX对HPVECs血管形成、迁移能力的影响.结果 显微镜下显示HPMSCs形似柳叶状,整体呈漩涡状生长,具备成脂肪、成骨及成软骨分化能力;透射电镜下显示HPMSCs-EX呈圆饼状,直径<150 nm;Western blot实验显示HPMSCs-EX表面特异抗原CD9、CD63表达呈阳性,Calnexin表达呈阴性;HPMSCs-EX能被HPVECs摄取.NC组和NC+HPMSCs-EX组实验结果差异无统计学意义(P均>0.05);LPS组细胞形态改变,细胞间连接松散,血管形成和迁移能力下降(P均<0.05),VEGFA和Vimentin表达下调(P均<0.05);LPS+HPMSCs-EX组细胞普遍增大,部分细胞变圆、变亮飘起,但多数细胞形态尚存,细胞血管形成和迁移能力改善(P均<0.05),VEGFA和Vimentin表达上调(P均<0.05).结论 HPMSCs-EX可能通过促进血管形成与迁移能力改善LPS诱导损伤的HPVECs功能.