基于环介导等温扩增的甲型流感病毒N1/N2亚型检测方法的建立

目的 建立用于甲型流感病毒N1/N2亚型的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),探索该方法在现场快速检测领域的使用前景.方法 根据甲型流感病毒N1和N2的基因序列分别设计6条引物,建立LAMP方法,用甲型流感病毒N1/N2感染者的咽拭子为阳性样本,以乙型流感病毒、人鼻病毒感染者的咽拭子样本为对照验证方法的特异性,用市售实时荧光定量PCR试剂盒和LAMP法同时检测106份疑似甲型流感病毒阳性样本,比较LMAP方法的灵敏度和特异性.结果 建立的甲型流感病毒N1/N2 LAMP方法检测用时少(30min)、重复性和特异性好,与乙型流感病毒、人鼻病毒未出现交叉反应.LAMP方法与市售实时荧光定量PCR试剂盒的检测结果有一致性(Kappa=0.706,P＜0.0001),特异性和灵敏度分别为90.0％和80.1％.结论 建立的甲型流感病毒N1/N2的LAMP检测方法快速、简单,特异性和灵敏度好,适用于现场检测.