健脾化瘀方调控circβ-catenin/Wnt通路介导肝癌细胞上皮间质转化的机制

目的:探讨健脾化瘀方抑制肝癌细胞增殖和侵袭的作用及机制.方法:制备健脾化瘀方冻干粉,干预人肝癌HepG2细胞后,CCK-8试剂检测细胞活力,划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力.qPCR检测circ β-catenin mRNA表达水平的变化,Western Blot检测细胞上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达.免疫荧光检测细胞β-catenin、N-cadherin的表达情况.结果:健脾化瘀方抑制肝癌HepG2细胞的增殖,随着药物浓度的升高,细胞活力显著降低.与空载质粒(p-vector)组比较,转染circβ-catenin质粒后,细胞迁移能力和侵袭能力显著提高(P＜0.01),circ β-catenin mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),Wnt2、β-catenin、Vimentin、N-cadherin蛋白水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).与p-vector组或circ β-catenin-OE组比较,健脾化瘀方干预后,抑制肝癌细胞发生EMT,下调Wnt2、β-catenin、Vimentin、N-cadherin蛋白水平(P＜0.05,P＜0.01),上调E-cadherin蛋白水平(P＜0.01).结论:健脾化瘀方能够抑制HepG2细胞的增殖及侵袭,其机制可能是通过调节circ β-catenin/Wnt通路介导EMT发挥作用.