猪圆环病毒2型LAMP可视化检测方法的建立与应用

为建立一种适用于猪圆环病毒2型(PCV2)现场、快速、可视化检测方法,本研究根据PCV2 ORF1基因中的保守序列设计合适的环介导等温扩增(LAMP)引物对,优化反应体系及条件,并评估该方法的灵敏度和特异性.结果显示,63℃恒温扩增45 min即可出现梯形条带,检测下限为1.0×101copies/μL,较普通PCR敏感性提高100倍,且当产物中加入SYBR Green I染料后可实现可视化检测.应用该方法对72份临床样品进行检测,结果显示,PCV2阳性率为47.2％(34/72),与qPCR检测的符合率为98.6％(71/72),与普通PCR的符合率为94.4％(68/72).结果表明,该基于LAMP的检测方法具有敏感特异、简便快捷、可视化的特点,为PCV2临床检测提供了一种新的选择.