沉默N⁃cadherin对人牙髓干细胞增殖和迁移能力的影响

目的 探讨沉默N?cadherin对人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)增殖和迁移能力的影响,为基于DPSCs的牙髓再生提供实验依据.方法 采用N?cadherin shRNA慢病毒转染DPSCs,qRT?PCR、West?ern blot检测N?cadherin的表达水平,验证沉默效率.实验分为阴性对照组(shRNA?NC)和N?cadherin shRNA沉默组.采用CCK?8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移能力.结果 N?cadherin shRNA可显著降低DPSCs的N?cadherin mRNA和蛋白的表达水平(P<0.001).N?cadherin shRNA组细胞增殖活性分别在细胞接种的第3、4天高于shRNA?NC组,第6～8天低于shRNA?NC组,差异均具有统计学意义(P<0.05);在第3天时,N?cadherin shRNA组处于S期和G2期的细胞比例大于shRNA?NC组(P<0.05);在第6天时,N?cadherin shRNA组细胞处于S期和G2期的比例小于shRNA?NC组(P<0.05),同时N?cadherin shRNA组凋亡细胞比例大于shRNA?NC组(P<0.01);分别以低细胞密度和高细胞密度接种于Transwell上室培养20 h,N?cadherin shRNA组穿过Transwell上室小孔的细胞数量均多于shRNA?NC组(P<0.001).结论 沉默N?cadherin表达可促进DPSCs早期的增殖和迁移能力.