Mortalin通过PI3K/AKT通路对人神经胶质瘤细胞U87增殖迁移的影响

目的 构建Mortalin慢病毒过表达载体和干扰载体,转染人神经胶质瘤细胞U87,探究Mortalin对U87细胞活力及增殖侵袭效应.方法 经PCR技术扩增得到Mortalin过表达片段,引物退火得到Mortalin干扰片段,连接线性表达载体并转染293T细胞后,从293T细胞上清液中获取Mortalin慢病毒载体.通过转染剂(感染增强液)转染U87细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,qRT-PCR检测转染Mortalin慢病毒载体后在U87细胞中表达状况.CCK-8实验、克隆实验、划痕实验分别验证Mortalin对U87细胞活力、增殖、迁移的影响,Western blot验证PI3K/AKT蛋白表达.结果 成功构建Mortalin慢病毒载体,转染人神经胶质瘤(U87)细胞.与Control组相比,NC组变化差异无统计学意义(P>0.05).与NC组相比,过表达Mortalin可以提高U87细胞集落形成和迁移能力(P均<0.05),PI3K/AKT蛋白高表达(P<0.05),而干扰组U87细胞则低表达(P<0.05).结论 Mortalin能够提高U87细胞活力,并通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞增殖、迁移.