三丁酸甘油酯对产肠毒素大肠杆菌K88诱发的小鼠肠道损伤的缓解作用

本试验旨在研究三丁酸甘油酯(TB)对产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用.试验1:选用(20±2)g的BALB/c小鼠50只,随机分为5组,每组10只.各组均饲喂基础饲粮,在第4天对照组腹腔注射0.5 mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS),试验组腹腔分别注射浓度为5.5×108、4.9×107、4.0×106、6.5×105 CFU/mL的ETEC K88悬液0.5 mL,连续观察3 d临床症状,统计腹泻率和死亡率,剖检、观察肠道病理变化,确定ETEC K88最佳造模剂量.试验2:选择(20±2)g的BALB/c小鼠105只,随机分为7组,每组3个重复,每个重复5只.空白组、阴性对照组饲喂基础饲粮,阳性对照组饲喂添加0.16％金霉素的饲粮,试验1、2、3、4组分别饲喂添加0.05％、0.10％、0.20％、0.30％TB的饲粮.连续饲喂14 d,在第15天空白组小鼠腹腔注射0.5 mL无菌PBS,阴性对照组、阳性对照组和试验组小鼠按照试验1中确定的最佳造模剂量腹腔注射ETEC K88悬液0.5 mL,继续观察3 d,采血、剖检,检测血清中二胺氧化酶(DAO)活性与内毒素(ET)、C-反应蛋白(CRP)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量,制作空肠组织切片,观察肠道组织形态变化.结果显示:小鼠腹腔注射不同浓度ETEC K88悬液后出现不同程度的腹泻和死亡情况,根据腹泻率和死亡率,确定4.9×107 CFU/mL为ETEC K88建立小鼠腹泻模型的最佳剂量.阳性对照组和试验3、4组的平均日增重与空白对照组差异不显著(P<0.05),但显著高于阴性对照组(P>0.05).小鼠的腹泻率表现为阴性对照组(53.33％)>试验1组(33.33％)>阳性对照组(26.67％)=试验2组(26.67％)>试验3组(20.00％)=试验4组(20.00％)>空白对照组(无腹泻发生).肠道损伤程度:阴性对照组>试验1组>阳性对照组>试验2组>空白对照组>试验4组>试验3组.与阴性对照组相比,各试验组以及阳性对照组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,以试验3组降低幅度最大,其次为试验4组.与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,但差异不显著(P>0.05).与阴性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了169.00％(P<0.05)、114.33％(P<0.05).与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了72.81％(P<0.05)和37.69％(P<0.05).由此得出,在小鼠基础饲粮中添加0.20％或0.30％的TB可以对抗大肠杆菌感染,缓解ETEC K88诱导的肠道损伤,且效果与添加0.16％的金霉素相当.