基于血清药物化学及网络药理学探究大青龙汤药效物质基础

基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,分析鉴定大青龙汤人血成分,并结合网络药理学探究大青龙汤药效物质基础.利用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),0.1％甲酸水(A)-0.1％甲酸乙腈(B)进行梯度洗脱,结合Peakview2.0、MetabolitePilot 1.5分析软件,对大青龙汤、空白血清及给药血清进行比较,结合数据库二级谱图及已有文献,分析鉴定大青龙汤的入血成分.利用SwissTargetPrediction、DrugBank、Batman-TCM数据库获取入血成分靶点,以 common cold、influenza、flu、bronchitis、bronchiolitis、asthma、allergic rhinitis、rhinallergosis、allergic coryza、rheumatic arthritis、nephritis为关键词,预测疾病靶点后构建入血成分-潜在靶基因、入血成分靶点-疾病靶点网络图,并对靶点进行 Gene Ontology(GO)分析和 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路分析,使用 iGEMDOCK 软件对人血成分和核心靶点进行分子对接.在给药血清中初步鉴定出28个成分,包括21个原型成分和7个代谢产物,得到麻黄碱、去甲基麻黄碱、甘草次酸、对羟基苯甲酸、2-甲氧基苯甲酸5个核心成分,TP53、AKT1、JUN等9个核心靶点,且分子对接显示核心成分与核心靶点结合性较好,推断大青龙汤可能通过MAPK、cAMP、cGMP-PKG等信号通路,改善、调节炎症反应等多种生理、病理过程发挥药理作用.该实验明确了大青龙汤的入血成分,探究了药效物质基础,为深入阐明大青龙汤作用机制及其临床应用提供了参考.