桦木酸对人胃癌SGC-7901细胞自噬的影响

通过不同梯度浓度的桦木酸处理SGC-7901细胞,研究桦木酸对细胞自噬相关基因表达的影响,从而确定桦木酸在胃癌细胞内与自噬的关联.将人胃癌SGC-7091细胞分为5组,其中3组设置桦木酸的浓度梯度分别为10,20,30 mg/L,使用经典抗癌药物氟尿嘧啶(5-Fu)作为阳性对照组,使用0 mmol/L桦木酸为阴性对照组,每组3个复孔,处理细胞48 h,用qRT-PCR和Western blot方法检测桦木酸对人胃癌SGC-7091细胞自噬相关基因mRNA和蛋白表达的影响,使用免疫荧光法定位并检测SGC-7091细胞内的LC3蛋白.与阴性对照组相比,梯度桦木酸处理组的细胞中LC3-Ⅱ,Beclin 1 mRNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.01),LC3-Ⅰ蛋白的表达明显降低(P<0.05).同时激光共聚焦的结果显示高浓度桦木酸诱导LC3蛋白在细胞质内的聚集现象.在设置的梯度浓度范围内,桦木酸能诱导人胃癌SGC-7091细胞发生自噬,且呈剂量依赖性,浓度升高诱导效果也升高.