湖羊SREBP1基因编码区序列克隆及表达分析

SREBP1是一个重要的核转录因子,参与调控胆固醇和脂肪酸等合成和代谢,本研究旨在基于获得湖羊SREBP1基因序列并分析其组织表达谱和卵巢中的表达定位,了解其在湖羊中可能的生物学功能.本研究利用RT-PCR技术对周岁湖羊卵巢组织中SREBP1基因编码区序列进行克隆和测序,用生物信息学软件对序列进行拼接、同源比对和功能预测分析,荧光定量PCR检测其在湖羊组织中的表达模式,免疫组织化学染色法鉴定其在卵巢组织中的定位.结果显示:SREBP1基因在湖羊卵巢组织中有2种剪接体,对应编码区长度分别为3369 bp和3441 bp,分别编码1122个和1146个氨基酸残基;SREBP1在哺乳动物中相对保守,含有经典的bHLH-Zip结构域,通过识别E-boxes或者固醇调节元件调控靶基因的表达;组织表达谱分析结果显示,SREBP1在湖羊组织中广泛表达,提示SREBP1基因可能参与调控湖羊多种生物学过程.免疫组织化学染色法分析结果显示,SREBP1基因在湖羊卵巢腔前卵泡和有腔卵泡中均有表达,主要定位于颗粒细胞、卵泡膜细胞和黄体细胞中,推测SREBP1可能在湖羊繁殖调控中发挥重要的作用.这些结果为进一步研究湖羊SREBP1基因的功能提供了基础.