猪圆环病毒三重PCR检测方法的建立及其广西地区流行病学调查

针对当前我国流行的猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)1型(PCV1)、2型(PCV2)和3型(PCV3),设计3对特异性引物,通过对引物浓度、退火温度和循环次数的优化,建立了鉴别检测PCV1、PCV2和PCV3的三重PCR方法.结果显示,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,只能检出PCV1、PCV2和PCV3,其他猪病毒均未能扩出;对PCV1、PCV2和PCV3质粒标准品的检测下限分别为3.63×103,3.63×101,3.63×102拷贝/μL;相同条件下的扩增获得均匀一致的结果.利用所建立的三重PCR方法检测2018-2020年采自广西各地的1 308份猪组织病料,结果显示,PCV1、PCV2和PCV3的阳性率分别为2.14％,56.65％,5.58％,并存在混合感染现象;PCV1、PCV2阳性率逐年下降,PCV3阳性率稳定控制,不同地市之间阳性率有所差异.结果表明,本研究成功建立了一种快速、特异、灵敏、经济的三重PCR方法,可用于PCV1、PCV2和PCV3的鉴别检测和流行病学调查;当前广西猪群普遍感染PCV1、PCV2和PCV3,应加强防控.