脑立体定位侧脑室注射海人酸构建癫痫大鼠模型的剂量探讨

目的 通过比较脑立体定位侧脑室注射不同剂量海人酸(KA)致痫效果探索大鼠癫痫模型的最佳注射剂量,为癫痫临床新药开发、日常用药指导及其发病机制的研究提供更理想的癫痫模型工具.方法118只Wistar大鼠,按随机数字表法分为正常组20只、KA0.5 μg组20只、KA 1 μg组20只、KA 1.5 μg组28只和KA 2 μg组30只,采用脑立体定位侧脑室注射KA复制癫痫模型后,观察各组大鼠的Racine分级和动物死亡率比较癫痫大鼠的造模成功率,水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,并通过苏木精-伊红染色、Nissle染色和免疫组化技术观察各组大鼠脑内损伤海马区的病理改变.结果 ①与正常组比较,注射不同剂量KA模型组均可导致不同程度的脑损伤,KA 1 μg剂量组的造模成功率高于其他各组(P＜0.005).水迷宫实验在定位航行实验中,1 μg以上的各剂量组和正常组比较,第4、5天逃避潜伏期出现明显的延长(P＜0.05),在空间探索实验中,1 μg以上的各剂量组和正常组比较,穿越原平台位置次数明显减少(P＜0.05);②与正常组比较,1 μg以上的各剂量组大鼠海马区神经元均出现明显损伤(P＜0.05),大鼠海马区MAP2阳性细胞数降低(P＜0.05).结论 KA 1μg以上的各剂量组相比正常组海马区均有不同程度的损伤,但从大鼠的造模成功率相比,注射1 μg比其他组有较大优势,所以将癫痫模型脑内注射KA的最佳剂量选定为1 μg,为癫痫动物模型的制备提供参考依据.