基于GAPDH重组蛋白建立羊肝片吸虫病间接ELISA检测方法

为了建立早期羊肝片吸虫病的血清学快速检测方法,本试验成功克隆并表达肝片吸虫GAPDH重组蛋白,West-ern blot 结果显示,该重组蛋白具有良好的抗原活性.用肝片吸虫GAPDH重组抗原包被,建立肝片吸虫病血清抗体的间接ELISA方法;随后优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时筛选其他反应条件.结果显示,间接ELISA方法批内和批间重复试验的最大变异系数均小于10％,GAPDH重组抗原与华枝睾吸虫、日本血吸虫和捻转血矛线虫阳性血清均无交叉反应.对来自黑龙江省各地区的96份羊血清进行检测,阳性率为16.67％(16/96).结果表明本试验建立的方法具有良好的敏感性和特异性,能够为早期诊断羊肝片吸虫病提供参考.