柯萨奇病毒A组10型高效价免疫血清的制备和应用分析

目的 利用CVA10不同毒株制备高效价免疫血清,并探索血清制备的影响因素和应用效果.方法 将CVA10-2044株和CVA10-N25株皮下免疫家兔、山羊和大鼠,或腹腔注射大鼠,测定血清中和抗体效价,分析不同抗原类型、动物种属及免疫途径对抗体应答的影响;用免疫血清对系列稀释的病毒进行棋盘中和,以确定完全中和不同剂量病毒所需血清量;中和法评价该免疫血清应用于病毒株鉴定、外源因子检测的效果.结果 CVA10-2044株纯化液经4次免疫后家兔中和抗体效价可达1 ∶ 4 096;CVA10-N25株收获液腹腔或浓缩液皮下和肌内免疫大鼠,2次或3次免疫后效价最高达1 ∶ 4 096和1 ∶ 6 144;N25株纯化液免疫山羊和家兔,4次免疫后效价最高可达1 ∶ 4 096.研究发现,完全中和50 000 CCID50病毒所需血清量为32 U,病毒量低于5 CCID50 时,1 U血清即可完全中和.2个毒株制备的免疫血清应用于病毒株鉴定结果和RT-PCR法鉴别结果一致.结论 CVA10-2044株或CVA10-N25株纯化液皮下免疫家兔或山羊、N25株收获液腹腔免疫大鼠均可获得高效价免疫血清,该血清可应用于病毒株鉴定和外源因子检测.