蛇床子素对高糖缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探讨蛇床子素对高糖缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响.方法 以高糖培养液培养人肾小管上皮细胞HK-2,并进行缺氧复氧处理建立细胞模型,CCK-8实验检测0、10、20、40、80、160 μg/mL浓度蛇床子素对其生长的影响,筛选最佳作用浓度.将HK-2细胞分为对照组、模型组、蛇床子素(80μg/mL)组、ML385(Nrf2抑制剂,20nmol/mL)组、蛇床子素(80 μg/mL)+ML385(20 nmol/mL)组,除对照组外其余各组以高糖缺氧复氧诱导建立细胞模型,以药物分组处理,CCK-8实验检测各组细胞活力;试剂盒测定各组细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及各组细胞释放乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肿瘤坏死因子-α(tumor necro-sis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1 β)水平;免疫荧光实验检测各组细胞Nrf2/HO-1通路蛋白表达;蛋白质印迹法检测各组细胞Nrf2/HO-1通路蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组HK-2细胞活力(100±0比43.47±6.14)、细胞GSH-Px水平(9.53±1.64比3.25±0.32)、细胞Nrf2(1.78±0.30比0.89±0.12)蛋白表达明显降低(P均＜0.05),HK-2细胞ROS(1.13±0.17比6.52±1.03)及TNF-α水平明显升高(P均＜0.05).与模型组、蛇床子素+ML385组分别相比,蛇床子素组HK-2细胞活力(43.47±6.14、44.83±7.06比87.76±9.42)、细胞 GSH-Px 水平(3.25±0.32、3.27±0.38比9.07±1.78)、细胞 Nrf2(0.89±0.12、0.90±0.18比1.74±0.26)蛋白表达升高(P均＜0.05),HK-2细胞ROS(6.52±1.03、6.47±0.96比 1.59±0.21)及TNF-α 水平降低(P 均＜0.05);ML385组 HK-2细胞活力(43.47±6.14、44.83±7.06比24.80±3.79)、细胞 GSH-Px 水平(3.25±0.32、3.27±0.38比0.88±0.15)、细胞 Nrf2(0.89±0.12、0.90±0.18比0.30±0.05)蛋白表达降低(P均＜0.05),HK-2细胞 ROS(6.52±1.03、6.47±0.96比9.76±2.02)及TNF-α水平升高(P均＜0.05).结论 蛇床子素可上调Nrf2/HO-1信号通路蛋白表达,减少高糖缺氧复氧诱导的ROS和炎性因子生成,进而抑制氧化应激及炎症反应,减轻肾小管上皮细胞损伤.