1,1′-双十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐标记的大鼠骨髓间充质干细胞与聚己内酯薄膜共培养制作细胞补片

Chinese Journal of Experimental Surgery(2022)

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摘要
目的:将聚己内酯(PCL)薄膜与1,1′-双十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐(DiI)标记的骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养,制备细胞补片。方法:取1只清洁级SD大鼠作为实验对象,通过分离培养获得大鼠BMSCs,并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后,使用DiI染料对BMSCs标记,将DiI标记的BMSCs与PCL制成的薄膜共培养,24 h后在荧光显微镜下观察细胞生长情况,并固定进行电镜扫描,在培养的1、4、7、10 d分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD分析。结果:BMSCs流式细胞术鉴定:CD90、CD44H强阳性,CD11b/c、CD45阴性。荧光显微镜下,可见DiI标记的BMSCs发红光,呈梭形或多边形。扫描电镜下,PCL薄膜与DiI标记的BMSCs共培养形成的细胞补片,其表面细胞数量多,细胞状态正常。CCK-8测定结果显示第1天吸光度( A)值为0.330±0.025;第4天 A值为0.620±0.012,第7天 A值为1.033±0.144,第10天 A值为1.223±0.133。各时间点A值之间差异有统计学意义( F=66.441, P<0.05)。 结论:PCL薄膜可以作为一种DiI标记示踪的支架材料,用于干细胞治疗。
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关键词
Bone mesenchymal stem cell,Scaffold,Polycaprolactone,Stem cell therapy
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