4种中草药单体对嗜热四膜虫生长和凋亡的影响

利用Hoechst 33258荧光染色、活细胞计数、CCK-8细胞活力测定、抗氧化酶活力测定等技术,研究了青蒿素、大黄素、芦荟大黄素、小檗碱(又名黄连素)等4种中草药单体对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)生长和凋亡的影响,为应用嗜热四膜虫筛选抗鱼寄生虫中草药提供参考.结果表明,采用Hoechst荧光染色,4种单体在高浓度(20～200mg·L-1)作用下均可使嗜热四膜虫凋亡,显著着色发亮.4种单体对嗜热四膜虫的半抑制浓度(IC50)和95％置信区间(95％confidence interval,95％CI),用细胞计数法测定依次为21.23(16.71～28.23)mg·L-1、3.77(1.91～5.54)mg·L-1、1.70(0.18～3.82)mg·L-1 和44.56(29.82～98.66)mg·L-1,CCK-8细胞活力测定法依次为20.03(13.02～28.45)mg·L-1、6.07(4.39～7.65)mg·L-1、3.67(2.61～4.72)mg·L-1 和 107.39(66.78～267.17)mg·L-1,CCK-8法与细胞计数法所呈现的趋势较为一致.在单体质量浓度为1.25～50.0mg·L-1,随着药物浓度的增加,过氧化氢酶(CAT)活力有升高趋势,而丙二醛(MDA)呈下降趋势,超氧化物歧化酶(SOD)活力先升高后降低.上述结果表明,4种中草药单体对嗜热四膜虫的生长和凋亡有剂量效应关系,凋亡的产生可能与细胞氧化应激状态改变有关.