猪源肠外致病性大肠杆菌耐药性分析及耐药基因和Ⅰ类整合子检测

[背景]由于抗生素的长期大量且不合理使用,猪源肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)多重耐药性日趋严重.[目的]探究猪源ExPEC的耐药性及其与耐药基因和Ⅰ类整合子的相关性.[方法]采用微量肉汤稀释法测定54株猪源ExPEC对22种抗生素的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);依据药敏试验结果确定相关耐药基因,采用PCR方法检测染色体DNA和质粒DNA上的耐药基因及Ⅰ类整合子分布情况.[结果]54株猪源ExPEC对青霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林高度耐药,其中52株对甲氧苄氨嘧啶、复方新诺明高度耐药,它们的MIC值均大于256μg/mL,无MBC值;对头孢唑林、四环素、头孢氨苄、大观霉素、链霉素的MIC值在1-256 μg/mL之间,MBC值分别为8、16、32、64、128、256 μg/mL,均可耐受11种以上抗生素,其中以耐受17种为主,占比为18.52％,耐药谱有47种.确定了7类相关耐药基因20种,染色体DNA除aph(3')-Ⅱa基因外的19种耐药基因均可检出,以aadAl和tetA检出率最高,所有菌株均携带5种以上耐药基因;质粒DNA除tetB、tetC、SHV、qnrA基因外的16种耐药基因均可检出,以floR和parC检出率最高,所有菌株均携带5种以上耐药基因.Ⅰ类整合子在染色体DNA和质粒DNA中阳性检出率分别为96.3％和98.15％,阳性菌株均为多重耐药.[结论]猪源ExPEC多重耐药性严重,耐药谱复杂多样,耐药基因与Ⅰ类整合子在染色体DNA和质粒DNA中分布率极高,耐药性的产生与耐药基因的存在具有一定相关性,而Ⅰ类整合子的存在又增加了耐药基因水平转移的风险.