补肾抗衰片对乳兔来源内皮细胞HO-1相关氧化应激水平的影响

目的:研究补肾抗衰片含药血清调节乳兔主动脉内皮细胞(RaECs)血红素氧合酶-1(HO-1)相关信号通路的机制.方法:分离培养RaECs,分别以1、10、100μmol/L浓度的HO-Ⅰ抑制剂Znpp-Ⅸ孵育RaECs 24h,再以10％补肾抗衰片含药血清干预72h.采用ELISA方法检测HO-1、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、p-选择素(P-selection)水平,荧光免疫细胞化学染色检测HO-1蛋白水平.结果:补肾抗衰片含药血清对RaECs未显示毒性作用,10％含药血清显示出最佳促细胞增殖效果;HO-1的特异性抑制剂Znpp-Ⅸ预处理RaECs 24h后可以使RaECs HO-1水平明显降低,而补肾抗衰片上调了HO-1水平(P＜0.05);不同浓度含药血清作用72h后显示,与对照组比较,补肾抗衰片降低了10μmol/L组MMP-2水平(P＜0.05),同时升高了MCP-1水平(P＜0.05),而补肾抗衰片对10μmol/L与100μ mol/L Znpp-Ⅸ处理组的P-selectin、MMP-9水平没有明显影响.结论:补肾抗衰片可诱导乳兔来源的主动脉内皮细胞MMP-2、MCP-1水平,这可能与调控其HO-1/CO信号通路有关.