下调miR-183靶向肿瘤抑制因子CPEB1增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性

Chinese Journal of Cancer Biotherapy(2021)

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摘要
目的:探讨miR-183对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响.方法:2020年10月至2021年6月,收集秦皇岛市第一医院40例脑胶质瘤组织标本,对T98G细胞进行梯度剂量X射线(0、2、4、6 Gy)照射.采用qPCR检测miR-183、细胞质多腺苷酸化元件结合蛋白1 (cytoplasmic polyadenylation element-binding protein 1,CPEB1)在脑胶质瘤组织、T98G细胞和经X射线照射的T98G细胞中的表达量.将miR-183 inhibitor转染T98G细胞后下调miR-183表达,经6 GyX射线垂直照射,CCK-8法、流式细胞术和WB法,分别检测T98G细胞增殖能力、细胞凋亡率及BAX和Bcl2蛋白表达量.Targetscan软件预测和双荧光素酶报告基因实验检测miR-183与CPEB1的靶向关系.下调CPEB1表达后,经6GyX射线照射,分别用CCK-8法、流式细胞术和WB法检测T98G细胞增殖能力、细胞凋亡率及BAX和Bcl2蛋白表达量.将pcDNA-CPEB1或CPEB1 siRNA质粒转染T98G细胞,分别下调或过表达CPEB1后,检测miR-183通过CPEB1对T98G细胞放射敏感性的影响.结果:脑胶质瘤组织和细胞中miR-183呈高表达,CPEB1 mRNA呈低表达.T98G细胞中miR-183的表达量随着X射线放射剂量增加而降低(P<0.05),CPEB1表达量随着X射线放射剂量增加而升高(P<0.05).6 GyX射线照射T98G细胞后,下调miR-183可降低细胞增殖能力、增加细胞凋亡率,而过表达miR-183则起到相反作用(P<0.05).miR-183靶向CPEB1 mRNA且负调控CPEB1表达.下调CPEB1表达后,经6 GyX射线照射可显著提高T98G细胞增殖能力(P<0.05)、降低细胞凋亡率(P<0.05),miR-183可逆转CPEB1过表达对细胞T98G放射敏感性的促进作用(P<0.05).结论:下调miR-183的表达能够负调控CPEB1,从而增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性.
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