FOXJ2转录激活胃癌细胞PD-L1表达并抑制T细胞抗肿瘤免疫的研究

[目的]研究免疫检查点PD-L1在胃癌细胞中的转录调控机制;探讨转录因子FOXJ2对PD-L1的转录调控,两者表达的相关性及其与胃癌患者预后的关系;揭示FOXJ2在调控T细胞抗肿瘤免疫中发挥的生物学功能.[方法]利用生物信息学方法筛选能够调控PD-L1的转录因子;免疫组化及免疫荧光检测FOXJ2和PD-L1在胃癌临床标本中的表达以及FOXJ2与CD8+T细胞浸润的关系;qRT-PCR与Western blot检测FOXJ2和PD-L1在胃癌细胞中的表达;ChIP实验验证FOXJ2与PD-L1基因启动子的直接相互作用;胃癌细胞与T细胞共培养实验检测T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力;流式细胞术检测肿瘤细胞中PD-L1表达情况及T细胞中TNF-α和IFN-γ的表达情况.[结果] JASPAR和PROMO数据库筛选出24个可能调控PD-L1的候选转录因子;癌症公共数据库显示FOXJ2与PD-L1的表达呈正相关(P＜0.05),高表达FOXJ2的胃癌患者生存期明显缩短(P＜0.01).FOXJ2在胃癌组织中的表达较癌旁组织显著上调,且与PD-L1的表达呈正相关关系(R=0.629,P＜0.01).qRT-PCR与Western blot证实胃癌细胞中敲低FOXJ2表达后PD-L1表达下降.ChIP实验证实FOXJ2与PD-L1基因启动子区域的直接相互作用.下调胃癌细胞中FOXJ2表达后,T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力增强;流式细胞术显示肿瘤细胞中的PD-L1下降,而T细胞中TNF-α和IFN-γ的表达升高.[结论]FOXJ2与PD-L1表达和胃癌患者的生存密切相关,阻断FOXJ2对PD-L1的转录调控有望成为胃癌免疫治疗的新靶点.