胆红素对幼年大鼠海马细胞凋亡及水通道蛋白4表达的影响

目的:研究幼年胆红素脑病(BE)模型大鼠海马中水通道蛋白4(AQP4)的表达变化,并且探究其与海马细胞凋亡及认知功能障碍的关系.方法:采用7 d龄SD幼年大鼠经小脑延髓池注射未结合胆红素(UCB)建立BE模型,根据UCB作用时间的不同将其分为12 h、24 h、48 h、72 h和7 d组.采用HE和Nissl染色观察各组海马病理变化;应用TUNEL染色法检测海马细胞凋亡;应用Western Blot检测海马AQP4、LAMP1、caspase-3和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;应用免疫荧光染色检测海马AQP4、LAMP1和GFAP的表达变化及AQP4+/GFAP+细胞数量的变化.结果:HE及Nissl染色显示,随着UCB作用时间的延长,海马神经细胞间隙不断变大,空泡逐渐增多,Nissl小体数量减少.TUNEL染色法显示海马凋亡细胞数量在UCB作用24 h组最多(P＜0.05).Western Blot结果显示,随着UCB作用时间的延长,海马细胞中caspase-3和LAMP1均上升至24 h达峰值(P＜0.05).免疫荧光结果显示,AQP4和GFAP均增加至48 h表达最高(P＜0.05),AQP4+/GFAP+细胞数量在48 h组达最多(P＜0.05).结论:UCB的神经毒性作用可导致海马细胞凋亡增加至24 h达峰值,继发星型胶质细胞代偿性增生,并伴随AQP4的表达增加至48 h达峰值,以上变化可能与BE的认知功能障碍具有密切联系.