花生五烯酸与透明质酸接枝物的合成及其抗肝癌活性

合成花生五烯酸(EPA)与透明质酸(HA)耦合物,初步评价其体外抗肝癌活性.通过胱胺将花生五烯酸与透明质酸连接,合成了一种透明质酸-花生五烯酸接枝物(HA-EPA),利用核磁共振仪(1H NMR)和傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)对其结构进行了表征,利用激光粒度及Zeta电位分析仪检测了其粒径与电位.采用MTT法检测了HA-EPA对肝癌细胞HepG2,Huh-7和正常肝细胞LX-2的体外抗细胞增殖作用.利用EdU染色与TUNEL染色法,考察了HA-EPA对HepG2细胞体外增殖与凋亡的影响.流式细胞术进一步验证了凋亡情况.通过迁移和侵袭实验考察了HA-EPA对HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响.1H NMR结果显示,HA-EPA被成功合成,且EPA在HA上的接枝率约(40±5)％;FT-IR结果进一步确证了HA-EPA的结构;粒径为(162.5±10.2)nm,电位为-(4.47±0.31)mV;MTT结果表明,随着药物处理时间延长,相同EPA含量下HA-EPA表现出优于EPA的对HepG2与Huh-7细胞活性抑制能力.当作用48 h,HA-EPA对正常肝细胞LX-2的毒性小于EPA.HepG2的24 h增殖、凋亡、迁移与侵袭实验结果显示,透明质酸的接枝提高了EPA抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡,抑制迁移与侵袭的能力(P<0.001),说明HA的接枝可以明显增强EPA的肝癌抑制效果并起到一定的减毒作用.