血管平滑肌SCAP过表达抑制自噬促进脂质积聚的机制研究

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白裂解活化蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage activating protein,SCAP)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化的影响及其分子机制.方法 构建LV-SCAP与LV-Control血管平滑肌细胞系,免疫印迹法检测SCAP及其下游相关蛋白nSREBP2表达水平;油红O染色观察负荷LDL胆固醇后脂滴积聚,酶标仪检测细胞总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)水平;单丹磺酰尸胺(monodansyl cadaverine,MDC)染色检测自噬小泡聚集;Western blot检测自噬相关蛋白LC3b、P62与AMPK-mTOR通路表达;mTOR抑制剂雷帕霉素处理LV-SCAP过表达细胞株,Western blot与油红O染色验证处理后效果.结果 与LV-Control组相比,LV-SCAP组nSREBP2表达明显上调(P＜O.05),经LDL胆固醇负荷后产生的脂滴增多,TC、TG水平明显增高(P＜0.05);LV-SCAP组细胞内自噬小泡聚集减少,自噬相关蛋白LC3b下调,P62上调,p-AMPK/AMPK水平降低,p-mTOR/mTOR水平升高(P＜0.05).Rapa处理结果显示LC3b表达增加,P62水平降低(P＜0.05),油红O染色脂滴沉积减少(P＜O.05).结论 SCAP可能通过影响AMPK-mTOR信号通路抑制血管平滑肌细胞的自噬过程,促进其泡沫化,进而参与血管动脉粥样硬化的发生发展.