针刺通过lncRNA MEG3调控AKT/mTOR自噬途径治疗大鼠多囊卵巢综合征的作用机制

目的 探究针刺通过lncRNA MEG3调控蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬途径治疗大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制.方法 取SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、针刺组、lncRNA MEG3 siRNA组、lncRNA MEG3 siRNA阴性对照组、针刺+lncRNA MEG3 siRNA组,每组12只.对照组喂养高脂饲料并灌胃等剂量0.5％羧甲基纤维素钠溶液,其余各组以高脂饲料喂养并灌胃来曲唑的方法制备PCOS模型,大鼠分别以针刺、lncRNA MEG3 siRNA及其阴性对照治疗2周,测定各组大鼠体质量及卵巢质量.采用试剂盒测定大鼠血清睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-18及活性氧(ROS)水平.HE染色观察大鼠卵巢形态及囊状卵泡数量.实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织lncRNA MEG3表达.蛋白免疫印迹检测大鼠卵巢组织自噬相关蛋白[Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ]与AKT/mTOR通路相关蛋白(p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR)表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量、卵巢质量、血清T、LH、IL-17、IL-18及ROS水平、囊状卵泡数量、卵巢组织AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平明显升高(P<0.05),卵巢组织lncRNA MEG3水平、Beclin-1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,针刺组大鼠体质量、卵巢质量、血清T、LH、IL-17、IL-18及ROS水平、囊状卵泡数量、卵巢组织AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平均降低(P<0.05),卵巢组织lncRNA MEG3水平、Beclin-1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均升高(P<0.05);lncRNA MEG3 siRNA组大鼠各指标变化趋势与针刺组相反;lncRNA MEG3 siRNA阴性对照组大鼠各指标无明显变化(P>0.05).与针刺组比较,针刺+lncRNA MEG3 siRNA组大鼠体质量、卵巢质量、血清T、LH、IL-17、IL-18及ROS水平、囊状卵泡数量、卵巢组织AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平均升高(P<0.05),卵巢组织lncRNA MEG3水平、Beclin-1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均降低(P<0.05);与lncRNA MEG3 siRNA组比较,针刺+lncRNA MEG3 siRNA组大鼠体质量、卵巢质量、血清T、LH、IL-17、IL-18及ROS水平、囊状卵泡数量、卵巢组织AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平均降低(P<0.05),卵巢组织lncRNA MEG3水平、Beclin-1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均升高(P<0.05).结论 针刺可通过上调卵巢组织lncRNA MEG3表达,抑制AKT/mTOR激活,增强自噬活性,抑制炎症反应,使PCOS大鼠性激素水平恢复正常,减少囊状卵泡形成,改善其多囊卵巢症状.