牛源致脑炎大肠杆菌多表位抗原的制备及免疫效果的初步评价

目的 为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果.方法 将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联,构建原核表达载体,然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化;用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后免疫小鼠,收集血清,利用间接ELISA方法检测抗体效价,并进行抗原性的检测;三免后进行攻毒保护实验并对小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量进行测定.结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达.Western-blot结果显示出现一条特异性条带,与预期的重组蛋白大小相符,表明成功制备出多表位抗原.重组蛋白免疫小鼠后血清特异性抗体效价高达1:204800.试验组小鼠攻毒后存活率为66％,对照组小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量均显著高于试验组.结论 重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用,具有研发牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的潜在价值.