sRNA rli106在单核细胞增生李斯特菌环境应激及生物被膜形成中的调控作用研究

单核细胞增生李斯特菌(LM)是一种重要的食源性病原菌,可适应不同的应激环境.为探究LM sRNA rli106基因的生物学功能,本研究以LM EGD-e为亲本株,通过PCR方法扩增sRNA rli106基因,并分析其分子特征;利用同源重组技术构建了LM-Δrli106基因缺失株和CLM-Δrli106基因回补株,分析比较LM EGD-e、LM-Δrli106、CLM-Δrli106在不同应激环境中的适应能力、运动性以及生物被膜(BF)形成能力,并通过qRT-PCR检测BF生成相关基因gltB和gltC的相对转录水平.结果显示,sRNA rli106基因大小为225 bp,上游序列含有-10 box和-35 box启动子核心区域,有转录调节因子CpxR的结合位点.与LM EGD-e、CLM-Δrli106相比,LM-Δrli106在42℃、5％NaCl、8％NaCl、5 mmol/L H2O2的环境应激下的适应性显著减弱,运动性无明显差异,在不同时间段的BF形成能力显著降低.qRT-PCR检测结果显示,LM-Δrli106中gltB和gltC基因的相对转录水平均有所降低.本研究结果首次表明,rli106基因在环境适应性和BF形成中发挥重要的调控作用,但不参与细菌运动性,为揭示rli106基因在LM环境适应性和BF形成中的分子调控机制奠定基础.