MALDI-TOF MS鉴定马尔尼菲篮状菌的实验条件优化

目的 构建用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)鉴定马尔尼菲篮状菌的数据库,并探索用于MALDI-TOF MS鉴定马尔尼菲篮状菌的最佳培养条件和前处理方法 .方法 利用8株马尔尼菲篮状菌构建自建数据库,比较不同培养基[沙保弱葡萄糖琼脂培养基(SDA)、沙氏葡萄糖肉汤培养基(SDB)]、培养温度(28、35℃)、培养天数、前处理方法 (甲酸乙腈法、直涂法)对质谱谱图质量及鉴定正确率的影响.结果 在VITEK MS科研模式(RUO模式)中成功构建马尔尼菲篮状菌质谱自建数据库.SDA较SDB更适合MALDI-TOF MS鉴定马尔尼菲篮状菌,后者采集的质谱谱图中干扰峰较多.两种温度培养采集的质谱谱图的特征峰相似,但35℃菌落的鉴定正确率略高.培养3～5 d时的菌落鉴定正确率均高于71.4％,其中培养5 d时鉴定正确率最高,可达100.0％.甲酸乙腈法的提取效果优于直涂法.结论 马尔尼菲篮状菌在SDA上35℃培养3～5 d,并使用甲酸乙腈法进行前处理可得到最佳的鉴定正确率.这对于形态不典型的马尔尼菲篮状菌同样适用.