携载丹酚酸B的丝素蛋白支架修复大鼠颅骨缺损的研究

目的 研究携载丹酚酸B(salvianolic acid B,SB)的多孔丝素蛋白(silk fibroin,SF)支架对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成骨分化的影响以及对大鼠颅骨临界性骨缺损的修复作用.方法 首先,分别将0.2 mg、1 mg和5 mg的SB加入5 mL 10％的丝素蛋白溶液中,通过冷冻冻干的方法形成不同载药浓度多孔支架,即低浓度支架(SF/LSB)、中浓度支架(SF/MSB)和高浓度支架(SF/HSB);根据SB的检测波长测定支架材料中SB的释放,细胞增殖及毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验、碱性磷酸酶活性和反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)用来检测支架中释放的 SB 对 rBMSCs 的增殖以及成骨分化作用,得出安全剂量组;最后将安全剂量组的支架植入大鼠颅骨骨缺损处,8周后通过Micro-CT扫描、序列荧光标记以及硬组织切片染色观察携载SB的SF多孔支架对骨缺损的修复作用,空白SF组当作对照.结果 SB稳定地从支架中释放出来,释放的SB在体外以剂量依赖的方式促进rBMSCs的成骨分化,但是SF/MSB和SF/HSB组间统计差异无统计学意义;体内实验结果显示与单纯的SF支架相比SF/MSB支架能够明显地促进新骨再生及矿化.结论 携载SB的SF多孔支架可显著促进rBMSCs的增殖、成骨分化,增强骨缺损的修复.