积雪草苷通过Notch1/Hes1信号上调自噬减轻糖尿病心肌病心肌损伤的作用及机制

目的 探讨积雪草苷(ASI)激活Notch1/Hes1信号调控自噬改善糖尿病心肌病(DCM)心肌损伤的作用及机制.方法 将100只8周龄雄性C57/BL成年小鼠随机分为对照组(sham组)、DCM组、ASI处理DCM组(ASI+DCM组)以及ASI联合Notch1抑制剂DAPT处理DCM组(ASI+DAPT+DCM组).对照组以普通饲料喂养,DCM组、ASI+DCM组以及ASI+DAPT+DCM组以高脂饲料喂养.1月后DCM组、ASI+DCM组以及ASI+DAPT+DCM组禁食12 h后进行链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,对照组腹腔注射同等体积生理盐水,STZ注射后72 h,测尾静脉空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),FBG>16.7 mmol/L为造模成功.造模成功后,ASI+DCM组腹腔注射ASI 10 mg/(kg·d),ASI+DAPT+DCM组同时腹腔注射ASI 10 mg/(kg·d)以及DAPT(10 mg/kg).自实验开始5月后,检测小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、结缔组织生长因子(CTGF)水平、左室射血分数(LVEF)等心功能指标,Masson染色检测心肌纤维化程度,免疫印迹检测Beclin1、Atg5、LC3Ⅱ/Ⅰ及Notch1和Hes1的表达.结果 与sham组比较,DCM组LVEF值降低(P<0.05),心肌纤维化程度增加(P<0.05),血清LDH、CTGF水平升高(P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin1和Atg5表达降低(P<0.05),而Notch1和Hes1表达增高(P<0.05).与DCM组比较,ASI+DCM组LVEF值增加(P<0.05),心肌纤维化程度改善(P<0.05),血清LDH、CTGF水平降低(P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin1和Atg5表达升高(P<0.05),而Notch1和Hes1表达降低(P<0.05).与ASI+DCM组比较,ASI+DAPT+DCM组LVEF值降低(P<0.05),心肌纤维化程度增加(P<0.05),血清LDH、CTGF水平升高(P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin1和Atg5表达降低(P<0.05),而Notch1和Hes1表达增高(P<0.05).结论 ASI通过抑制Notch1/Hes1信号增强自噬减轻DCM引起的心肌损伤.