碳水化合物结合域CBM3对外切葡聚糖酶性质的影响

纤维素酶与底物的可及性是酶水解的主要限制因素之一.碳水化合物结合域(CBM)可以提高纤维素酶与底物的可及性,从而促进纤维素酶的酶促水解.本研究探究外源的CBM对外切葡聚糖酶(CBH)性质的影响.我们将一个外源的CBM3与CBH进行融合,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)X33中成功表达,得到了CBM3-CBH和CBH的纯酶.比较两者对于微晶纤维素(Avicel)的结合能力和酶学性质.结果显示CBM3-CBH对Avicel的结合能力比CBH高8％,但是两者对不同底物的催化活性无显著差异.两者的最适反应温度均为60℃,最适反应pH均为6.结果表明,外源的CBM虽然能在一定程度上提高CBH对底物的结合能力,但对CBH的酶学性质没有实质性影响.本研究为探究CBM在纤维素酶催化过程中的作用机制奠定了良好的基础.