姜黄素对嗜热四膜虫的氧化应激、凋亡诱导及线粒体损伤作用

以嗜热四膜虫为模式生物从氧化应激、凋亡及线粒体损伤作用探讨姜黄素的毒性效应,为姜黄素用药及生态安全提供依据.急性毒性实验:姜黄素(0.625、1.25、2.5 μg/mL)作用四膜虫2 h,通过快速细胞分析仪计数细胞,光学显微镜观察细胞形态变化;氧化应激:荧光酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平及乳酸脱氢酶活性(LDH);线粒体损伤:JC-1探针法检测线粒体膜电位(MMP)的变化;凋亡实验:Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染流式细胞仪检测细胞凋亡率.实验结果显示,姜黄素对四膜虫的毒性呈剂量依赖效应,0.625、1.25、2.5μg/mL分别抑制了16％、32％、37％,2.5 μg/mL处理组细胞形态发生显著变化;此外1.25、2.5 μg/mL处理组的细胞内ROS分别增加了35％、44％(P＜0.05).LDH的结果表明各浓度的姜黄素均能破坏细胞膜通透性,与对照组相比分别增加了10％、17％、45％.2.5 μg/mL的姜黄素处理组能够引起线粒体膜电位(MMP)去极化(P＜0.05),凋亡率增加7.42％(P＜0.05).姜黄素对嗜热四膜虫存在毒性作用,抑制细胞增殖,并通过氧化应激作用破坏细胞膜,增加细胞膜通透性,2.5 μg/mL的姜黄素能够诱导四膜虫细胞凋亡并伴随线粒体损伤,暗示姜黄素可能通过激活线粒体途径诱导嗜热四膜细胞的凋亡.